Proč obracet Petriho misku?

Přemýšleli jste o pěstování celé kultury bakterií, řekněme, pro vědu nebo pro zábavu? Tato záležitost je kupodivu překvapivě jednoduchá. Vše, co potřebujete, je agarové živné médium, několik sterilních Petriho misek a bakterie!

Část 1 ze 3: Příprava Petriho misek

1. Připravte agarové živné médium. Agar je rosolovitá látka používaná k pěstování bakteriálních kultur. Agar se vyrábí z červených a hnědých řas a poskytuje ideální prostředí pro mnoho různých druhů mikroorganismů. Někdy se do agaru přidávají další látky, jako je ovčí krev, pokud je cílem dosáhnout rychlejšího růstu mikroorganismů.

Nejjednodušší je použít práškový agar. Budete potřebovat 1.2 gramu (½ čajové lžičky) na každých 10 cm Petriho misky.

V žáruvzdorné nádobě zřeďte agarový prášek v 60 mililitrech (¼ šálku) horké vody. Chápete, 60 ml je na jednu Petriho misku. Sami si spočítejte potřebný podíl.

Nádobu s vodou a práškem vložte do mikrovlnky a po přivedení vody k varu minutu povařte. Hlavní věc je, že agarový roztok „neutíká“.

Živné médium se považuje za připravené, když je prášek zcela rozpuštěn a samotná kapalina je čirá.

Nechte pěstební médium vychladnout a poté pokračujte dalšími kroky.

2. Připravte si Petriho misky. Už jste je viděli – malé ploché kelímky ze skla nebo průhledného plastu. Petriho misky mají dvě části, horní a spodní, vkládají se do sebe, což slouží k ochraně kultury mikroorganismů před vzduchem a dalšími potenciálními zdroji kontaminace a dále obsahuje plyny uvolňované mikroorganismy během růstové fáze.

Petriho misky musí být sterilní. Sterilní! V opačném případě půjdou výsledky experimentu na pěstování bakterií do odpadu. Pokud si Petriho misky kupujete, měly by se prodávat v hermeticky uzavřených obalech (takové misky jsou předem sterilizovány metodou za studena).

Vyjměte kelímky z obalu a oddělte poloviny. Velmi opatrně nalijte živnou půdu do spodní poloviny kelímku v tenké vrstvě, jen zakryjte dno.

Rychle uzavřete Petriho misku, aby se do agaru nedostaly vzdušné bakterie. Nechte Petriho misky v klidu uležet 30-120 minut, dokud živná půda nevychladne a neztuhne (hotová živná půda bude připomínat želé).

3. Ochlaďte Petriho misky. Pokud neplánujete okamžitě zavést bakterie do jejich nového domova, musíte Petriho misky umístit do lednice, dokud nepřijde jejich čas.

Uložení Petriho misek v lednici zajistí, že se voda nevypaří (a bakterie vodu milují). Navíc živná půda v mrazu trochu ztvrdne a zabráníte tak jejímu náhodnému roztržení při přidávání bakterií.

Petriho misky by měly být uloženy v chladničce dnem vzhůru. Na víčku se tak nebude hromadit kondenzát, který pak bude odkapávat zpět a kazit živné médium.

Petriho misky s živnou půdou lze uchovávat v lednici několik měsíců. Když na ně přijde řada, vyjměte kelímky z lednice a nechte je ohřát na pokojovou teplotu.

Část 2 ze 3: Rostoucí bakterie

1. Umístěte bakteriální kulturu do Petriho misky. Agar je pevný, Petriho miska má pokojovou teplotu – vše je připraveno k pokračování experimentu! Co je dál v plánu? Správně, přidání bakteriální kultury do živného média! A zde jsou dvě metody – buď přímý kontakt, nebo odběr vzorků.

Přímý kontakt: V tomto případě se bakterie dostanou do agaru. ano, přímým kontaktem s ním. Jednou z nejběžnějších metod přesazování tímto způsobem je prostý lehký dotyk prstu na povrch pěstebního média (před nebo po umytí rukou, na tom nezáleží). Případně se ho můžete dotknout nehtem nebo dokonce starou mincí. Můžete jednoduše položit vlas na živnou půdu nebo tam kápnout kapku mléka. V zásadě použijte svou představivost!

Odběr vzorků: Tato metoda umožňuje odebrat vzorky mikroorganismů z jakéhokoli povrchu a přenést je do pěstebního média. Vše, co potřebujete, jsou vatové tyčinky. Jednoduše protáhněte tyčinku tam, kde chcete odebrat vzorek mikroflóry (buď z úst nebo z klávesnice), poté stejným koncem tyčinky přejeďte po povrchu živné půdy (netrhejte ji). Za pár dní uvidíte zajímavé a hrozné výsledky svého experimentu!

Alternativně lze do Petriho misky přidat mikroorganismy z různých zdrojů – k tomu stačí misku rozdělit na čtvrtiny.

2. Petriho misky uzavřete, označte a utěsněte. Po umístění bakterií na pěstební médium je třeba na misku nasadit víko a utěsnit ji něčím jako páskou.

Nezapomeňte v každém konkrétním šálku označit, co a kde roste, jinak si to později nepamatujete. Můžete psát fixem.

Jako zvláštní opatření můžete každý šálek uložit do samostatného sáčku na zip. To poskytne další vrstvu ochrany pro rostoucí bakterie. Pokud je obal průhledný, nebude vám to bránit v prohlížení výsledků.

3. Umístěte Petriho misky na teplé a tmavé místo. Dejme tomu na pár dní, aby bakterie mohly nerušeně růst. A nezapomeňte, že Petriho misky stále musíte skladovat dnem vzhůru, aby náhodné kapky kondenzátu padající z víka nekazily krásu kolonie mikroorganismů.

Optimální teplota v této fázi je někde mezi 20-37 Celsia. Pokud však potřebujete, aby mikroorganismy rostly pomaleji, vždy je můžete přemístit na chladnější místo.

Nechte bakteriím růst alespoň 4-6 dní. Během této doby se kultura vyvine docela dobře. O zahájení růstu budete informováni charakteristickou vůní vycházející z Petriho misek.

4. Zaznamenejte své výsledky. Po pár dnech si všimnete, že v každé Petriho misce je hustý růst něčeho jiného – bakterií, plísní, hub atd.

Zaznamenejte svá pozorování každého šálku a vyvodte závěry o tom, kde bylo nejvíce bakterií.

Co to máš v ústech? A na klice? A co klávesnice? Ach, výsledky vás ohromí.

Pomocí speciální značky můžete sledovat rychlost růstu bakterií každodenním kreslením obrysu kultury na dno Petriho misky. Za pár dní bude dno vypadat jako řez dřeva – všechno je v kruzích!

5. Vyzkoušejte účinnost antibakteriálních látek. Bude zajímavé sledovat, co se stane, když do bakteriální kultury přidáte něco antibakteriálního (například mýdlo). Jak efektivní to bude?

Pomocí vatového tamponu dejte do středu kapku něčeho antibakteriálního a poté pokračujte v experimentu jako obvykle.

Bakterie v kalíšku porostou a vytvoří prstenec kolem oblasti, kde byla antibakteriální látka aplikována. Nebudou tam žádné bakterie, jedná se o tzv. „mrtvá zóna“.

Účinnost antibakteriálních látek lze porovnat posouzením šířky mrtvé zóny v různých Petriho miskách. Princip je jednoduchý: čím širší zóna, tím účinnější látka.[3]

Část 3 ze 3: Bezpečná likvidace mikroorganismů

1. Dodržujte všechna bezpečnostní opatření. Před likvidací je třeba dbát na bezpečnost.

Ano, většina vašich bakterií nebude představovat hrozbu. Jistou hrozbu však mohou představovat velké kolonie bakterií, proto je nejprve zabijte bělidlem.

Při práci s bělidlem si chraňte ruce gumovými rukavicemi, oči brýlemi a oděv zástěrou.

2. Nalijte bělidlo do Petriho misek. Po otevření kelímku do něj opatrně nalijte malé množství bělidla. V tuto chvíli držte misku nad dřezem. Kontakt s bělidlem zabíjí bakterie.

Nelijte bělidlo na kůži, spálí se.

Vydezinfikované Petriho misky vložte do sáčků na zip a všechny je vyhoďte do koše.

Můžete také použít bramborový agar: k tomu budete potřebovat 20 gramů brambor, 4 gramy agaru a 2 gramy dextrózy (glukózy). Vše svařte v odměrce. Poté tekutinu nalijte do Petriho misky a nechte zaschnout. Poté vezměte sterilní vatové tampony a otřete je tam, kde jsou bakterie, poté vložte bakterie do růstového média a uzavřete Petriho misku. Přes den ji dejte na teplé místo. Druhý den byste již měli vidět kolonii mikroorganismů.

Nikdy nepěstujte nebezpečné mikroorganismy. Tělesné tekutiny by neměly být umístěny na Petriho misku. Pokud se takové kelímky otevřou, může dojít k přenosu vážného onemocnění.

Petriho miska je jedním z nejběžnějších typů laboratorního skla. Bez ní je nemyslitelné si představit práci biologické, biochemické nebo lékařské laboratoře. Standardně je to nízký široký válec, vlastně talířek. Obvykle se dodává s víkem o trochu větším průměru. Víko chrání obsah před prachem, ale nebrání cirkulaci vzduchu, která je pro zkoumané mikroorganismy často nezbytná.

Existují, i když méně běžně používané, hranaté Petriho misky.

Odrůdy

Nejběžnější nádoby se pohybují ve velikostech od 50 do 100 mm a jsou vysoké přibližně 15 mm. I když se produkty vyrábějí jak s menšími, tak mnohem většími průměry a různými výškami.

Existují modely rozdělené do dvou, tří nebo čtyř sekcí. Obvykle se používají ke studiu stejných bakterií na různých živných médiích. Okolní teplota, vlhkost vzduchu a další parametry jsou přitom přirozeně stejné. To umožňuje provést srovnávací analýzu co nejpřesněji. Použití jedné nádoby pro několik studií místo dvou, tří nebo čtyř navíc výrazně snižuje spotřebu živného média.

Petriho misky lze také rozdělit na:
• sklenka;
• plast na jedno použití;
• plast opakovaně použitelný.

Výrobní proces

Mikrobiologické sklo se vyrábí vyfukováním a lisováním, zpravidla však v aseptickém prostředí. Jedná se o prostředí, ve kterém se nevyskytují viry, bakterie, plísně a další potenciálně nebezpečné mikroorganismy. Vzduch v místnostech, kde se kelímky vyrábí a balí, je průběžně čištěn od prachu a testován na biologické nečistoty.

Některé kelímky jsou vyráběny za sterilních podmínek a již sterilní, obvykle v individuálním balení, jsou dodávány kupujícímu. Nejčastěji se jedná o výrobky z polystyrenu nebo jiného plastu.

Vlastnosti použití a účelu

Hlavním účelem Petriho misky je pěstovat v ní mikroorganismy. K tomu je šálek naplněn agarem nebo jiným živným médiem. Naočkují ji a pozorují růst kolonie. Z hlavního účelu vyplývá hlavní vlastnost tohoto nádobí – musí být buď sterilní, pokud je jednorázové, nebo podléhající sterilizaci, pokud je určeno k opakovanému použití.

Petriho miska je navíc vždy průhledná. Nejen proto, aby se dění v něm dalo pozorovat bez otevření, ale aby na bakterie dopadalo sluneční světlo.

Výrobek se také používá pro:

• studie účinků léků na mikroorganismy a tkáně;
• kultivace buněk, práce s biologickými vzorky;
• provádění reakcí s malými objemy chemikálií;
• tření, sušení, odpařování různých materiálů;
• pitva rostlin, hmyzu, malých zvířat;
• klíčení zrn;
• dozrávání vajíček obojživelníků v něm, např. některých ještěrek;
• skladování drobných předmětů.

Co nabízíme

V internetovém obchodě simax.ru můžete zakoupit následující typy Petriho misek:
• jedno-, dvou-, tří- a čtyřsekční;
• s průměrem od 34 do 250 milimetrů;
• vyrobeno z borosilikátového a sodného skla. Ty jsou méně odolné vůči alkáliím a teplotním šokům, ale jsou průhledné a hladké jako borosilikátové.

Všechny kelímky Simax jsou dodávány s víčky, všechny jsou té nejvyšší kvality. Dodržujte ruské a mezinárodní normy pro laboratorní sklo tohoto typu.

Jak objednat

Vybraná Petriho miska? Jednoduše si jej zakoupíte kliknutím na tlačítko koupit vedle produktu. Pokud máte dotazy nebo chcete zadat objednávku prostřednictvím manažera, zavolejte na číslo +7 495 161 99 25 nebo požádejte o zpětné zavolání – tlačítko vpravo nahoře na stránce. Můžete nám také napsat na adresu info@simax.ru.